Descrizione

Una fiala di coltura liquida è un liquido in cui si possono iniettare spore di funghi concentrate. La coltura liquida vi aiuta a dividere meglio le spore di funghi sul substrato. Questo accelera il processo di colonizzazione del micelio. Una coltura liquida serve anche a prevenire il sovradosaggio di parti specifiche del substrato. Questo è un problema che fa crescere il micelio molto lentamente.

Come preparo la mia fiala di coltura liquida per i funghi?

Con la cultura liquida Mondo viene consegnata una piccola scheda di istruzioni. La cultura liquida Mondo contiene aghi, due fiale e salviette di alcol. È molto importante pulire la siringa dopo averla usata. Questo migliora la qualità delle spore e la contaminazione.

Forniture Mondo Liquid Culture Vial

 

• Fiamma a gas (l'accendino "tempesta" è il migliore)
• Fiala di sospensione di spore SporeMate o siringa di spore, fiala di coltura liquida Mycomate (contenente micelio), kit di clonazione Mycomate o altro terreno di coltura adatto.
• Kit di funghi o sclerozi commestibili Mycomate, o altro substrato adatto al processo di coltivazione (se si desidera ottenere un risultato finale a base di funghi).
• Mani pulite e un luogo di lavoro pulito

Come preparo la mia fiala di coltura liquida Mondo in 11 passaggi

 

1. 1. Se la fiala di coltura liquida è stata conservata in frigorifero, toglierla dal frigorifero 24 ore prima dell'uso.
   2. Lavarsi accuratamente le mani (è possibile utilizzare un sapone antibatterico) e asciugarle con carta da cucina.
   3. Rimuovere la fiala di coltura liquida dalla busta e posizionarla su un tavolo pulito e privo di correnti d'aria.
   4. Pulire il sito di iniezione della fiala di coltura liquida e qualsiasi altro sito di iniezione richiesto (fiala di sospensione di spore o fiala di coltura liquida colonizzata) con un tampone di alcol. Prendere un nuovo tampone di alcol per ogni sito di iniezione utilizzato. Questa operazione è necessaria per evitare la formazione di batteri.
   5. Estrarre la siringa/ago dalla busta. Rimuovere la plastica che ricopre l'ago (girare in senso orario e tirare). Non toccare la punta dell'ago, altrimenti dovrà essere risterilizzato *. (vedi foto A) * Gli aghi possono essere sterilizzati alla fiamma. Tenere l'ago nel fuoco finché non diventa rosso. Fare attenzione a non scaldarsi troppo e a non fondere la plastica a cui è attaccato l'ago. Lasciare sempre raffreddare l'ago prima di iniettare!
   6. Quando si usa la fiala di sospensione di spore o di coltura liquida colonizzata, agitare prima la fiala per distribuire bene la sospensione. Inclinare la fiala e inserire l'ago al centro del sito di iniezione. Prelevare la porzione di sospensione desiderata e rimuovere l'ago. Fare attenzione a non far entrare aria nell'ago. (vedi foto B)
   7. Iniettare da poche gocce a 1 ml di sospensione di spore o poche gocce di sospensione di coltura liquida colonizzata (se si usano più fiale di coltura liquida) nella fiala di coltura liquida. Far uscire delicatamente l'ago dalla fiala, poiché la pressione eccessiva potrebbe far schizzare fuori dalla fiala un po' di sospensione (questo è normale). (vedi foto C)
   8. Pulire nuovamente il sito di iniezione della fiala di coltura liquida con un tampone di alcol, lasciarla asciugare per un po' e conservarla in un sacchetto (ziplock) senza aria e in posizione verticale.
   9. Agitare il flacone (10 secondi) una volta al giorno e non esporlo alla luce del sole. Incubare le spore nel micelio a una temperatura adeguata (in genere 23-27ºC). Una temperatura più bassa rallenta il processo di crescita, ma una temperatura più alta aumenta il rischio di contaminazione. (vedi foto D) Nota: le temperature variano a seconda del ceppo di funghi.
   10. La crescita è la stessa sia per le spore che per la coltura liquida. La crescita da spore richiede più tempo di quella da coltura liquida. Sospensione di spore: Le spore germinano normalmente entro 24-72 ore. Entro 3-7 giorni si dovrebbe poter osservare la colonizzazione (crescita insieme) del micelio nella parte inferiore della fiala. Nota: la fiala di coltura liquida MycoMate richiede solo poche spore per la crescita del micelio. Coltura liquida: La crescita è visibile entro 24 ore dal trasferimento della sospensione di coltura liquida nelle nuove fiale di coltura liquida. I nuovi flaconi sono solitamente pronti all'uso in pochi giorni (a seconda della varietà, della specie e della temperatura). Il modo migliore per determinare se il processo di crescita sta andando bene è tenere il flacone alla luce senza agitarlo. Se si è agitato comunque, i sedimenti del terreno di coltura galleggeranno verso l'alto, rendendo più difficile vedere la crescita (questo non è un problema, si ridurrà da solo). Le nuvole bianche di micelio si solleveranno quando avrete preso in mano la fiala in modo corretto (vedi foto D). Anche se il micelio può sembrare una nuvola, l'intera fiala non deve essere torbida/intorbidita. Il micelio sano deve essere in grado di vedere attraverso le nuvole. In caso contrario, il flacone è probabilmente contaminato. Lasciare il flacone

prima riposare per qualche ora e verificare che non siano i sedimenti del terreno di coltura a causare l'intorbidimento. La fiala può essere utilizzata non appena è visibile una crescita sana del micelio o dopo 1 o 2 settimane quando è visibile un numero maggiore di miceli sani. Nota: quando uno o due terzi della fiala è stata colonizzata, deve essere utilizzata o conservata in condizioni di refrigerazione per un uso successivo (vedi sotto).

1. Una volta completata la colonizzazione, la fiala può essere utilizzata per inoculare altre fiale di coltura liquida MycoMate (ripetere i passaggi da 1 a 10), i kit di funghi commestibili o di sclerozi MycoMate (ripetere i passaggi da 1 a 6).

Contenuto della fiala di coltura liquida Mondo

• Mondo Liquid Culture Vial 10 e 25ml
• Salviette alcoliche sterili
• Siringa sterile con ago da 18

Conservazione della fiala di coltura liquida Mondo

Trattandosi di un prodotto delicato, si consiglia di riporre il flacone di spore in frigorifero per 24 ore dal ricevimento, a una temperatura compresa tra 2 e 8 gradi, prima di utilizzarlo.