Descripción

Un vial de cultivo líquido es un líquido en el que puede inyectar esporas de champiñón concentradas. El cultivo líquido le ayuda a dividir mejor las esporas de hongos sobre el sustrato. Esto acelera el proceso de colonización del micelio. Un cultivo líquido también se utiliza para evitar la sobredosificación de partes específicas del sustrato. Este es un problema que hace que el micelio crezca muy lentamente.

¿Cómo preparo mi vial de cultivo líquido para setas?

Con el Mondo Liquid culture se entrega una pequeña tarjeta de instrucciones. El cultivo líquido Mondo contiene agujas, dos viales y toallitas de alcohol. Es muy importante limpiar la jeringa después de usarla. Esto mejora la calidad de las esporas y la contaminación.

Suministros Mondo Liquid Culture Vial

• Llama de gas (lo mejor es un mechero "tormenta")
• Frasco de suspensión de esporas SporeMate o jeringa de esporas, frasco de cultivo líquido Mycomate (con micelio), kit de clonación Mycomate u otro medio de cultivo adecuado.
• Kit de setas comestibles o esclerocios Mycomate, u otro medio / sustrato adecuado para el proceso de cultivo (cuando se deseen setas como resultado final).
• Manos limpias y un lugar limpio para trabajar

Cómo preparo mi frasco de cultivo líquido Mondo en 11 pasos

1. 1. Si la ampolla de cultivo líquido se ha mantenido refrigerada, sáquela del frigorífico 24 horas antes de su uso.
   2. Lávate bien las manos (una opción es el jabón antibacteriano) y sécatelas con papel de cocina.
   3. Saque la ampolla de cultivo líquido de la bolsa y colóquela sobre una mesa limpia y sin corrientes de aire.
   4. Limpie el lugar de inyección del vial de cultivo líquido y cualquier otro lugar de inyección necesario (vial de suspensión de esporas o vial de cultivo líquido colonizado) con una torunda con alcohol. Tome un nuevo hisopo con alcohol para cada sitio de inyección que se utilice. Esto es necesario para evitar la formación de bacterias.
   5. Saque la jeringa / aguja de la bolsa. Retire el plástico que cubre la aguja (gire en el sentido de las agujas del reloj y tire de él). No toque la punta de la aguja o tendrá que volver a esterilizarla *. (ver foto A) * Las agujas pueden esterilizarse en una llama. Mantenga la aguja en el fuego hasta que se ponga roja. Tenga cuidado de que no se caliente demasiado y se derrita el plástico al que está unida la aguja. Deje siempre que la aguja se enfríe antes de inyectar.
   6. Cuando utilice la suspensión de esporas o el vial de cultivo líquido colonizado, agite primero el vial para distribuir bien la suspensión. Incline el vial e inserte la aguja en el centro del punto de inyección. Extraiga la porción necesaria de la suspensión y retire la aguja. Tenga cuidado de que no entre aire en la aguja. (ver foto B)
   7. Inyecte entre unas gotas y 1 ml de la suspensión de esporas o unas gotas de la suspensión de cultivo líquido colonizada (si utiliza varios viales de cultivo líquido) en el vial de cultivo líquido. Suelte suavemente la aguja del vial, ya que el exceso de presión puede hacer que salga un poco de suspensión del vial (no pasa nada). (ver foto C)
   8. Limpie de nuevo el punto de inyección del vial de cultivo líquido con una torunda con alcohol, déjelo secar un rato y guárdelo en una bolsa (ziplock) sin aire y en posición vertical.
   9. Agitar el frasco (10 segundos) una vez al día y no exponerlo a la luz solar. Incube las esporas en micelio a una temperatura adecuada (normalmente 23-27ºC). Una temperatura más baja ralentiza el proceso de crecimiento, pero una temperatura más alta aumenta el riesgo de contaminación. (véase la foto D) Nota: Las temperaturas difieren según la cepa del hongo.
   10. El crecimiento es el mismo tanto para las esporas como para el cultivo líquido. El crecimiento a partir de esporas tarda más que a partir de Cultivo Líquido. Suspensión de esporas: Las esporas germinan normalmente en un plazo de 24 a 72 horas. En un plazo de 3 a 7 días debería poder observar la colonización (crecimiento conjunto) del micelio en la parte inferior del vial. Nota: El vial de cultivo líquido MycoMate sólo necesita unas pocas esporas para el crecimiento del micelio. Cultivo Líquido: El crecimiento es visible en las 24 horas siguientes a la transferencia de la suspensión de Cultivo Líquido a los nuevos frascos de Cultivo Líquido. Los nuevos frascos suelen estar listos para su uso en pocos días (dependiendo de la variedad, la especie y la temperatura). La mejor forma de determinar si el proceso de crecimiento va bien es sostener el frasco al trasluz sin agitarlo. Si se ha agitado de todos modos, los sedimentos del medio de cultivo flotarán hacia arriba, dificultando la visión del crecimiento (no pasa nada, desaparecerán por sí solos). Las nubes blancas de micelio flotarán hacia arriba cuando hayas cogido bien el vial (véase la foto D). Aunque el micelio parezca una nube, no todo el vial debe estar turbio / nublado. El micelio sano debe poder verse a través de las nubes. Si no es así, es probable que el frasco esté contaminado. Deje el frasco

primero reposar unas horas y comprobar que no era el sedimento del medio de cultivo lo que provocaba el enturbiamiento. El vial puede utilizarse tan pronto como haya un crecimiento visible de micelio sano o al cabo de 1 o 2 semanas, cuando sea visible más micelio sano. Nota: Cuando se hayan colonizado entre uno y dos tercios del vial, deberá utilizarse o almacenarse en condiciones de refrigeración para su uso posterior (véase más abajo).

1. Una vez completada la colonización, el vial puede utilizarse para inocular otros viales de cultivo líquido MycoMate (repita los pasos del 1 al 10), kits de hongos comestibles MycoMate o kits de esclerocios (repita los pasos del 1 al 6).

Contenido del frasco de cultivo líquido Mondo

• Mondo Cultivo Líquido Frasco 10 y 25ml
• Toallitas estériles con alcohol
• Jeringa estéril con aguja de calibre 18

Conservación del vial de cultivo líquido Mondo

Dado que se trata de un producto sensible, le recomendamos que coloque el frasco de esporas en el frigorífico durante 24 horas tras su recepción a una temperatura de entre d e 2 y 8 grados antes de utilizarlo.